IVD研发人员的新晋神器—人源化抗体

相当比例的临床样本中含有一种或多种的内源性干扰物质，包括人抗小鼠抗体（human anti-mouse antibodies, HAMA），嗜异性抗体（Heterophil antibody，HA），类风湿因子（Rheumatoid factors，RF），自身抗体，补体，溶菌酶等。这些内源性干扰物质会在免疫分析中与试剂中的动物蛋白交叉反应，引起假性结果，导致误诊或不必要的检查、治疗[3]。所以，内源性干扰的消除是检测试剂成功落地的一个非常重要的因素。

目前消除内源性干扰的方法主要有：

1. 加入免疫阻断剂；

2.更换原料抗体的种属；

3.改造检测抗体或捕获抗体；

4.对于检测抗原的试剂盒，去除样本中的全部免疫球蛋白。

其中，成本最低，见效最快的方法，就是添加免疫阻断剂，把干扰物质阻断于抗原-抗体结合之前。但是，不同样本之间内含的干扰物质差异极大。阻断剂使用不足，往往达不到阻断效果；使用过量，阻断剂又会降低真实信号。到了研发后期，对阻断效果的调试往往最繁琐，耗时，很容易延误研发进度，导致项目迟迟落不了地，甚至会错过市场风口。

抗体人源化是指利用DNA重组技术和蛋白质工程技术，对抗体基因进行重组，在保留鼠单抗对抗原有效结合部位的同时，将抗体的其他部分改造成人源序列，最大限度地降低非结合部位的鼠源性。这种通过重组基因表达的既有鼠源成分，又有人源成分的抗体被称为人源化抗体（humanized antibody）。人源化抗体是通过基因工程制备的，所以又可称为基因工程抗体（genetically engineered antibody）。

研究表明，90%的HAMA反应是针对鼠抗体恒定区的[5]，而人源化抗体的恒定区来源于人类，所以人源化抗体可以很好地避免HAMA效应的产生。

在一项关于人类肝癌细胞抗体的研究中，研究人员分别测定hHP-1（人源化单抗）、HP-1单抗（鼠单抗）、人IgG三者与HAMA的结合能力。结果表明：HP-1（鼠单抗）随着血清中的HAMA浓度增加，含量下降；而hHP-1（人源化单抗）、人IgG的含量不随血清中的HAMA浓度增加而改变，证明HP-1（鼠单抗）会与血清中的HAMA结合，而hHP-1（人源化单抗）、人IgG则不会[6]。

因此，人源化抗体作为免疫诊断的包被原和标记原使用时，可以有效避免引起临床样本中可能存在的HAMA效应，从源头上减轻研发人员后期调试阻断效果的压力，加速项目落地。另外，人源化抗体的恒定区来源于人类，试剂研发人员在开发过程中可直接采用羊抗人或鼠抗人等来源广泛，产量充足的原料作为二抗，极大的降低试剂研发的难度和成本，提高项目最终成功落地的几率，是IVD研发人员的新晋神器。

1. 嗜异性抗体对检测结果干扰的两例临床病例分析

2. 异嗜性抗体对化学发光检测结果的影响

3. 内源性干扰对免疫分析的影响

4. 常见抗体药物研发策略

5.  嵌合抗体技术研究进展

6. A Humanized Monoclonal Antibody Constructed from Intron less Expression Vectors Targets Human Hepatocellular Carcinoma Cells

作者：SERION原料事业部