之前听说某公司免疫层析平台十几个产品，老板强制统一样稀，仅仅是为了客户使用方便。说实话，如果这种做法仅仅是为了弥补由于客户操作失误而引发的问题，那还不如多花点时间去给客户多增加一些培训，因为这种做法在研发工程师来看，简直就是一个笑话。十几个产品想通过一个简单的样稀配方去搞定，可能性不是没有，只不过我觉得着实有些难为研发人员了。有时候老板的思维是发散和跳跃的，当领导的没必要舔着脸去迎合吧，适当的泼点凉水并不会影响你的职位，对公司的健康发展也是有利的。
很多做研发的小白刚接触层析平台的时候，总喜欢用纯水、PBS代替样稀或阴性样本，来观察自己试剂的特异性，而且吧，这种情况还就真特别容易出假阳。有时候纠结了好长时间，各种调试，最后一上真实阴性血清却发现，假阳没了！我们先撇开基质效应这个词，就光说用水测试特异性的做法，同学们还真是应该摒弃这个习惯。为什么用水出假阳，用阴性血就很好呢，这个我们后面分析。我只想说，这种情况，只能说你的整个的缓冲体系达不到预期的缓冲效果，但如果使用正常的血清不影响你的性能，又何必纠结这些呢？
接下来我们来分析一下用纯水测试出假阳的问题。这个问题说起来貌似很简单，但是想解释一下吧，却发现并不好解释其中的原理。咱们可以先回顾一下抗原抗体的结合原理，先看一下特异性的结合是靠的哪些方式。
这是从某PPT上截的图，我们从高中就学过，说是抗原抗体的结合主要靠氢键、静电、范德华、疏水作用几种力。氢键作用力指的是N—H……N、O—H……O、N—H……O、O—H……N这种的两个负电基团中间靠1个质子连接的力，比如我们知道的碱基AT和GC之间的氢键；静电指的就是带正电的基团和带负电的基团之间的静电引力，比如-COO-和-NH4+之间的吸引力；范德华力就是极性基团和之间的引力，类似与静电引力但是作用力更弱；疏水作用就是指的疏水基团互相靠拢的一种吸引力，类似于水包油小颗粒形成大颗粒的一种作用力，据说这种作用力是抗原抗体结合的主要动力。当然了，这只是理论上的解释，真正的抗原抗体结合肯定要比这个更复杂。
其实我觉得，不管是特异性结合还是非特异性结合，能让两个抗体产生非特异性吸引的力无外乎就是以上这几种力，我们可以试着分析一下非特异性吸附产生的原因和解决办法。比如说上面提到的，我用纯水上样，整个体系里几乎没有盐分，那么由非特异性产生的各种引力就没有任何的阻碍，容易产生假阳；假如我加入了一些NaCl，那么它可以平衡掉一些非特异性的静电引力和范德华力，理论上可以提高特异性；假如我引入一些H+或者OH-，那么它可以封闭掉抗体本身的氢键作用力，理论上也可以提高特异性；假如我加入一些表活，那么液体整体的张力会降低，也就不利于疏水基团的聚拢，理论上也是可以提高特异性的；假如我加入一些杂蛋白，比如BSA，它可以替代掉一些抗体与抗体本身的吸附，而是产生（抗体-BSA）这样的吸附，理论上也是可以提高特异性的。所以，一个提高特异性的思路也就出来了，缓冲体系+NaCl+pH调节+表活+杂蛋白+…，这样的话，样稀的作用也就出来了。我们可以看到，提高特异性有诸多方面，因此每个项目的处理方法肯定不一致，所以统一样稀是很难实现的。
当然，以上仅是针对于提高特异性方面讲述了一下样稀的作用，其实它的作用还有很多，而且很多拿证的项目生产过程出现了问题，又懒得变更其他东西的话，那最简单的只有更换样稀的成分。我再举几个例子说一下它其他的作用。我还是拿之前的例子说话：
就这个检测模式，我们如果样稀不做处理，那么血清中能和T线结合的可不见得就只有IgG，IgM或者IgA等其他类型的抗体都可以和T线上的N抗原结合，那就和IgG形成了竞争关系，影响检测性能；如果掺入了羊抗人IgM、羊抗人IgA等多抗，那性能是不是有所改善呢？
再举个例子，现在的很多人都用过抗体药，有一部分抗体药是鼠抗改造的，如果使用这种药物，很难保证人自身不产生抗鼠抗体，那HAMA就产生了。如果样稀里含有鼠源IgG阻断剂，是不是就好很多呢？
或者最简单的，比如我的PCT抗体配对只有在pH9.6的时候反应，特异性和灵敏度最高，那这个环境可能是样品垫里那点盐提供不了的。
所以，同学们，我们在做层析平台的时候，要好好利用好样稀这个东西，抗体对一旦筛选确定了，能对性能做出改善的大概率也就是在这里了。我们在做项目的时候，既不能钻牛角尖，也不能不思考，要结合自己的实验结果充分发散自己的思维。
与大家共勉！
编辑：Jason | 校对：Harris | 责编：Hillson
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