为什么抗原抗体需要避免反复冻融?

添加时间:2022年9月20日
为什么抗原抗体需要避免反复冻融?
德国维润赛润CACLP展位号:B5-0805

抗原或抗体的保存条件非常重要,只要条件得当,一般都可以保存几个月到几年。对于多数的抗原或者抗体而言,分装保存在-20℃或者-80℃是最佳的方法,且保存过程中应注意避免反复冻融。

 

为什么需要避免反复冻融?

肯尼亚医学研究所的Carolyne M. Kifude等在测试抗原rPfHRP2 的稳定性中发现,在第5次反复冻融后,抗原的回收率开始迅速下降。有资料显示,反复冻融的过程中易产生冰晶,而冰晶的形成会破坏蛋白质结构,从而使蛋白失效。

为什么抗原抗体需要避免反复冻融?

那么,如何防止冰晶的形成?

 

通常需要添加甘油和乙二醇等冷冻保护剂来抑制水分子之间的氢键结合,降低水溶液的冰点,从而防止冰晶的形成。

 

冷冻保护剂最佳的浓度是多少?

 

保护剂的实际冰点取决于保护剂的特性和浓度(见表 1)。当储存温度低于冷冻保护剂抗体溶液的冰点时,溶液会凝固。然而,通常会发生玻璃化(快速冷却,低温时形成的一种高黏度的介于液态和固态之间、非晶体、透明的玻璃态),而不是冰晶形成,在玻璃化过程中,溶液固化而不形成晶体,因此抗原或抗体的结构完整性得以保持。

为提高稳定性,可添加甘油或乙二醇至终浓度为 50%,然后将抗原或抗体分装储存在 -20°C,防止冰晶的形成,避免抗体变性。由于甘油可能被微生物污染,因此在用于抗体储存时使用无菌甘油制剂至关重要。

 

表1:不同浓度(%)冷冻保护剂的冰点(℃)
浓度(%)
甘油(glycerol)
乙二醇(ethyleneglycol)
10
-2
-4
20 -5
-7
30
-10
-15
40 -16 -23
50 -22
-34
60 -34
-48
70 -38
-51
80
-19
-45
90
-2
-29
100
17
-12

1、Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Detection of Plasmodium falciparum Histidine-Rich Protein 2 in Blood, Plasma, and Serum

2、Antibody stability: A key to performance – Analysis, influences and improvement

3、Antibody Storage and Antibody Shelf Life

 

编辑:Jason | 校对:Harris | 责编:Hillson

 
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公司简介

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德国维润赛润(Institut VirionSerion GmbH)成立于1978年,是国际知名的诊断产业原料生产商和供应商。公司的研发和生产基地位于德国维尔茨堡,已通过DIN EN ISO 13485质量体系认证,拥有三级生物安全实验室(P3实验室)。经过了40余年的发展,公司构建了丰富的生物原料产品线,主要包括天然抗原、重组抗原、人源化单克隆抗体和磁珠等。

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