POCT层析产品，自1990年应用于定性检测孕妇尿液和血清中的HCG以来，已经走过了三十多个年头，在而立之年遇上黑天鹅新冠迎来了大爆发，三十年的时间里始终围绕着灵敏度和特异性两大主旋律不断发展，持续突破。
如今，有宣传可以检测10pg/ml浓度的新冠病毒检测层析产品，也有灵敏度可以做到0.1 IU / mL的乙肝表面抗原检测产品。为了提高这根简简单单试纸条的灵敏度，你都尝试过哪些方法呢？
一、抗原抗体原料
抗原抗体原料是试剂条的核心，产品灵敏度的强弱至少有七成是你所使用的原料决定的，抗原抗体结合力的强度说白了是他们之间表位亲和力的强度，亲和力越强产品灵敏度就越强高，一对原料无法满足你的灵敏度要求时，可以选择两对或者更多，再或者一个标记搭配两三个包被，这对于多种突变株待测物也是经常使用的方法。
二、标记物粒径
判读结果是由标记物直接呈现的，胶体金的粒径越大，灵敏度越强，胶体金常用的粒径是40nm，一般不会超过100nm，也可以选择粒径更大的乳胶，乳胶颜色鲜艳，粒径200nm-500nm均有。大粒径标记物能提高灵敏度一方面是可视化，另一方面降低了跑板速度，增加抗原抗体的反应时间。不过大粒径标记容易聚集导致跑板堵膜，或是跑板背景不干净。
三、NC膜孔径
NC膜孔径正好相反，膜孔径越小灵敏度越高，这是因为小孔径的NC膜使跑板速度减缓，延长抗原抗体反应时间导致产品灵敏度升高，当然孔径小背景退白就慢，同时也增加了一些非特异性吸附，带来假阳。NC膜的选择还需要根据你所选用的标记物粒径大小，40nm的胶体金选择范围很大，但是大粒径的乳胶微球，如果你选用180的膜估计是跑不动的。
四、试剂条卡壳
试剂条卡壳对灵敏度带来的影响有时候会被大家忽略，它对产品灵敏度的影响主要是加样孔的设计和上盖卡标记垫卡条厚度，其中后者影响最大，它可以控制待测样本层析上NC的释放速度，卡条厚度越高，待测物与标记抗原/抗体反应时间就越长，结合物释放越慢，灵敏度越高。有些厂家会用不干胶粘一下标记垫与NC膜交会处，同样也可以降低样本的释放速度。我们可以实验比较一下，一根裸条和一个加卡壳且标记垫被卡条卡很紧的产品，条子的灵敏度可能会低一个色卡左右。
五、化学试剂
试剂条的开发，我们会用到好几个稀释液，包被稀释液、标记稀释液，样品垫处理液等。包被稀释液比较简单，一般是PBS加点糖，没有太大的调试空间，样品垫处理液相对复杂一下，样品垫是最先接触到待测样本的部件，相当于是对待测物的前处理，样品垫处理液的缓冲体系、PH、离子强度、表活等都会影响抗原抗体的结合效率，其中表活S9比其它如Tween-20、曲拉通对产品灵敏度的提高影响更大，大分子PEG20000对灵敏度的提升也有很大帮助。
六、Bio-SA放大系统
Bio-SA放大系统，是一个应用在免疫反应中比较成熟的一种放大系统，首先链霉亲和素和生物素的亲和力跟抗原抗体不是一个级别的，其次理论上一个SA可以结合四个Bio，直接导致了这种信号的放大效果，以夹心法测抗原举例，我们一般是将一个检测抗体偶联标记物，另一个偶联Bio，通过夹心法形成标记物-抗体-抗原-抗体-Bio，然后由SA捕获多个Bio进行放大。
七、试剂条结构
试剂条的结构通常是样品垫、标记垫、NC膜、吸水纸加底板，为了控制流速，我们可以使用双标记垫或者在标记垫与NC膜之间进行搭桥来降低跑步速度，提高抗原抗体反应时间，从而提高产品灵敏度。不过双垫对于生产来说是一件比较头疼的事情，尤其对于自动化生产基本上是很难操作的。
结尾
我们这里只讲到了产品的灵敏度，当然还有产品的特异性，所有提高灵敏度的方法都有可能给特异性带来挑战，它们俩相生相克，如影随形。有人说层析产品灵敏度再怎么强也不可能超过发光，那是当然，因为两者定位就不一样，如今层析产品新冠能做到pg级别，其实也是难以想象的，你说做到10pg和100pg区别大吗？对于新冠我觉得真不大，到了临床，真阳那都是强阳，不过对于很多传染病产品，灵敏度越高是可以做到早发现的。以上均为一家之言，欢迎一起交流。
来源：IVD工具人
公司简介
助力我们的客户更加强大
永葆我们的价值无可替代
