在免疫检测试剂开发、使用过程中，干扰问题是经常遇到的问题之一。今天，我们将探讨干扰的概念及其分类，并描述应对这一问题的常用分析和解决方法。
干扰是指在临床化学中，由于另一组分的影响或者标本的性质导致的待分析物检测浓度的临床显著差异的原因。其可能由于检测系统的非特异性、 指示剂反应的阻遏、 待分析物的阻遏或者一些其它标本依赖性偏差，在定量检测试剂中，可能引起被测样本浓度的显著偏低或偏高，在定性检测试剂中，可能引起假阳性或假阴性，最终可能导致临床医生对患者的诊断产生偏差。
首先我们看看干扰主要有些什么类型：
病理情况下产生的代谢物，如糖尿病、 多发性骨髓瘤、 瘀胆型肝炎等；
患者治疗过程中的物质介入，如药物，肠胃外营养，抗凝剂等；
标本准备过程中的添加物，如抗凝剂，防腐剂，稳定剂等；
标本处理过程中无意引入的物质，如手套滑石粉，收集管胶塞，手霜等；
标本自身的基质效应，其理化性质跟理想的新鲜样本不同。
通常来说，常见的干扰物质主要有类风湿因子、异嗜性抗体、人抗动物抗体（如HAMA）、自身抗体、补体、生物素、溶血、脂血、胆红素等。
前面我们提到，干扰通常会引起测值的偏差或者阴阳性的不符，当我们遇到类似样本或者接到客户的反馈投诉，我们首先需确定这份样本是真实的偏差还是由于干扰问题导致的。针对有临床信息的患者样本，我们需结合患者情况来进行推测可能的干扰物。比如生物素的大量服用，现在主要是美容、治疗脱发及一些神经性疾病，在治疗神经多发性硬化症患者中使用的生物素含量最高，其血液中可能存在的生物素含量也最高。（如检测系统使用生物素-亲和素系统）；另外肿瘤治疗中会用到一些靶向药物及一些抗体药物，这些药物可能会激发人体产生一些异嗜性抗体；长期接触鼠类、兔类及羊类的人员也可能在体内产生针对这些种属的抗体。对于已知信息比较全面的样本，我们针对可能的干扰物直接进行检测，比如类风湿因子、HAMA、生物素等定量检测试剂盒，通过检测结果来判定疑似干扰物的浓度是否能够达到相应的干扰程度。
另外大部分情况是未知的干扰物，针对这类样本，首先简单有效的方法是稀释，通过使用被测项目的阴性血清（浓度接近本底，同时排除基质效应问题）进行稀释，如10倍、50倍、100倍的稀释，通过稀释来降低干扰物的浓度，大部分情况随着干扰物浓度显著降低，干扰物对检测结果的干扰程度也随之变化，因此回收浓度与理论浓度会存在不同程度的差异；另外我们也可以通过添加各类主动型或者被动型阻断剂，以达到降低干扰的情况，这种添加阻断剂的方式应在平时实验过程中就有积累，以达到不同的阻断剂能解决不同的干扰物问题；有时候我们也可以将稀释和阻断剂同时使用以达到最优效果。但以上办法我们均应在实验过程中设置可靠的对照，以便于对结果的准确判断。
对于出现干扰情况，我们事后的检测确认已经是迫于无奈的选择，对于试剂盒开发人员，应该在试剂盒设计初期就充分考虑到可能发生的干扰问题，并且尽量的降低干扰可能发生的概率，因此在针对各类可能的干扰问题时，我们在试剂盒开发过程中应该注意部分问题：
a.生物素干扰（在前几期集中讲过，可以考虑添加抗游离生物素抗体或增加亲和素的使用量）；
b.类风湿因子、补体，这两种干扰物可以与抗体的Fc片段结合，通常可以考虑酶切去除抗体Fc片段来解决；
c.嗜异性抗体，一类可以与山羊、小鼠、大鼠、马、牛IgG的Fab区域结合，但不与兔IgG结合，另一类可以与兔、小鼠、牛IgG的Fc区域结合，但不与山羊、大鼠IgG的Fc区域结合。因此可以添加大量的动物IgG来解决，当然应添加足够量并且是相同亚类的IgG；HAMA（人抗小鼠抗体）,添加大量小鼠IgG来解决，另外如果两株抗体种属不同，也可以避免此干扰问题。
对于各类试剂盒开发的经验心得，欢迎大家私聊交流。感谢观看，希望有用。
文章来源于体外诊断研发大杂烩，作者LuminousZh
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编辑：Jason | 校对：Harris | 责编：Hillson
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德国维润赛润（Institut VirionSerion GmbH）成立于1978年，是国际知名的诊断产业原料生产商和供应商。公司的研发和生产基地位于德国维尔茨堡，已通过DIN EN ISO 13485质量体系认证，拥有三级生物安全实验室(P3实验室)。经过了40余年的发展，公司构建了丰富的生物原料产品线，主要包括天然抗原、重组抗原、人源化单克隆抗体和磁珠等。
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