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德国维润赛润CACLP展位号:B5-0805
酶联免疫吸附实验是将已知的抗原或抗体结合在固相载体表面,然后利用酶标记(偶联)的抗体或抗原与之孵育,在通过显色物显色,其显色深浅与待测物质的含量成正比,用肉眼即可观察。
可用于抗体的亲和力、特异性检测。
特点:已广泛应用,需要实验设备
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot,简称WB。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
可用于抗体的特异性、热稳定性和纯度检测
特点:已广泛应用,需要实验设备
可用于抗体的亲和力、特异性检测。
特点:快速,可实时提供结果,但仪器设备相对昂贵
SDS-PAGE是一种变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳法,其原理是根据大多数蛋白质都能与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白质分子所带的负电荷远超过天然蛋白质分子的静电荷,消除了不同蛋白质分子的电荷效应,使蛋白质按分子大小分离。
可用于抗体的纯度、聚集体、降解检测。
特点:已广泛应用,因使用变性样品,因此不检测生物学功能。
可用于抗体的纯度、聚集体、降解检测。
特点:已广泛应用,样品需稀释。
DLS 依赖于自由漫射材料,由于布朗运动随机传播,将在散射激光中产生快速变化的原理。这些强度波动的时间尺度需要几十纳秒到几百毫秒。这些变化与粒子的运动直接相关。获得从激光散射强度产生的信号并将其转换为自相关函数。这是测量粒度分布的基础。
可用于抗体的纯度、聚集体、降解检测。
特点:快速,需要特殊设备。
差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)是一种通过热力学角度研究分子稳定性的方法,近年来也常应用于蛋白质的稳定性分析。其基本工作原理为:蛋白质的去折叠过程需要吸收热量,DSC通过线性的升温,测量样品溶液与空白溶液热容上升的差值,并以此预测样品分子在不同溶液状态下的稳定性。
可用于抗体的热稳定性、未折叠检测。
特点:灵敏,可用于检测未折叠蛋白,但仪器设备相对昂贵。
差示扫描荧光(differential scanning fluorimetry, DSF)是在荧光定量PCR仪上缓慢加热样品,在加热的过程中检测荧光染料与结构发生改变的蛋白质相结合的量,来评价蛋白质热稳定性的方法。
可用于抗体的热稳定性、未折叠检测。
特点:检测方法灵敏,但需要实时PCR设备。
9、圆二色谱 Circular dichroism,CD
除以上外,核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)和质谱(Mass spectroscopy ,MS)也已用于抗体稳定性测定。
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