为了防止微生物污染,在配制抗体工作液过程,通常会加入防腐剂防止微生物污染,如最终浓度在0.02-0.05%(w/v)的叠氮化钠(NaN 3)或终浓度为0.01%(w/v)的硫柳汞或0.02% 的 ProClin 300可以抑制微生物的生长。
叠氮化钠是常见的一种通用防腐剂,可抑制细菌生长,溶于水、液氨,不溶于乙醚,微溶于乙醇,用量一般为0.02%~0.05%。在多数情况下,叠氮化钠对包括人类在内的大多数生物体都有毒。对大多数革兰氏阴性菌都具有很好的抑菌作用(见图 1);然而,许多革兰氏阳性细菌(链球菌、肺炎球菌、乳酸杆菌)的效果较差(见图 2 ) 。由于其含有氨基,会干扰辣根过氧化物酶(HRP)、超氧化物歧化酶、触酶等多种酶,若需要偶联,抗体溶液中的叠氮化钠可通过透析或凝胶过滤去除。
图 1.不同浓度的叠氮化钠抑制革兰氏阴性菌的生长。
硫柳汞又名乙基汞硫代水杨酸钠,是一种含汞有机化合物,以重量计含汞49. 6%。硫柳汞为广谱抑菌剂,对革兰阳性菌、革兰阴性菌及真菌均有较强的抑制能力。其作用机理为汞离子与菌体中酶蛋白的巯基结合,从而使酶失去活性。此外,它对疫苗中的抗原还具有稳定作用,自20 世纪30 年代以来,一直被广泛用作生物制品和药品的防腐剂。硫柳汞在药品和生物制品中的使用浓度一般在0. 02% – 0. 05%之间。由于担心潜在毒性问题,1999年开始逐步被淘汰。
ProClin™防腐剂是水溶性抗菌剂,是体外诊断(IVD)行业中最有效的抗菌剂之一,其作用于Krebs循环的四个关键位置:丙酮酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和NADH脱氢酶。所有的细菌及真菌至少拥有部分KREBS循环,所以ProClin活性具有广谱适用性。低工作浓度下,ProClin™产品有效快速地抑制广谱微生物,有助于延长IVD试剂的保质期。
来源:Antibody Storage and Antibody Shelf Life
编辑:Jason | 校对:Harris | 责编:Hillson
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德国维润赛润(Institut VirionSerion GmbH)成立于1978年,是国际知名的诊断产业原料生产商和供应商。公司的研发和生产基地位于德国维尔茨堡,已通过DIN EN ISO 13485质量体系认证,拥有三级生物安全实验室(P3实验室)。经过了40余年的发展,公司构建了丰富的生物原料产品线,主要包括天然抗原、重组抗原、人源化单克隆抗体和磁珠等。
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